Některé předměty nejsou povoleny uvnitř muzea, aby byla zajištěna bezpečnost a ochrana uměleckých děl. Mezi zakázané předměty patří, ale nejsou omezeny na:
Ve Vatikánských muzeích je k dispozici bezplatná šatna, kde je možné zanechat zakázané předměty.
*Vodicí psi musí být na vodítku a s náhubkem, a terapeutická zvířata budou vpuštěna pouze s certifikátem.
Vatikánská muzea vyžadují, aby se návštěvníci oblékali skromně, se zakrytými rameny a koleny. Nevhodná jsou trička bez rukávů, šortky, minisukně a klobouky.
Návštěvníci by se měli vyvarovat přílišného odhalování kůže; ve Vatikánu a muzeích se očekává skromné oblečení. Není dovoleno odhalovat ramena, půlky těla nebo přílišnou kůži na nohou.
Ukazování dekoltu se při vstupu do Vatikánských muzeí nepovažuje za vhodné oblečení. Je třeba nosit skromné oblečení, aby byla respektována posvátná povaha tohoto místa.
Do Vatikánských muzeí jsou přijatelné džíny, pokud nejsou otrhané nebo odhalující. Návštěvníci by měli dbát na to, aby džíny kombinovali se skromným vrškem, který zakrývá ramena a hrudník.
Malé batohy a kabelky jsou do Vatikánských muzeí povoleny, ale mohou být podrobeny bezpečnostní kontrole. Velká zavazadla a kufry musí být zkontrolovány v šatně.
Dovnitř není dovoleno nosit ostré předměty, zbraně, deštníky, skleněné nádoby a alkohol. Úplný seznam doporučujeme prostudovat v pokynech.
Fotografování pro osobní potřebu je ve Vatikánských muzeích povoleno, ale fotografování s bleskem a stativem je zakázáno.
V Sixtinské kapli je přísně zakázáno fotografovat a natáčet, aby bylo zachováno umění a atmosféra úcty.
Návštěvníci si mohou do Vatikánských muzeí vzít láhev s vodou, doporučujeme však, aby byla plastová a uzavíratelná, aby nedošlo k poškození uměleckých děl a prostor.
Při vstupu do Vatikánu sice neprojdete formální celní kontrolou, ale při vstupu do Vatikánských muzeí proběhne bezpečnostní kontrola podobná letištní kontrole.